荧光人图片怎么染色，如何用photoshop进行荧光双染的复合

来源：整理时间：2023-06-12 06:48:20 编辑：航空兔素材手机版

本文目录一览

1，如何用photoshop进行荧光双染的复合
2，高达HG的观星者的模型上色
3，急求间接免疫荧光双染实验步骤
4，PI 染色操作步骤

1，如何用photoshop进行荧光双染的复合

两张图调为50%透明度，然后图层叠加，可以做到merg的效果。

也可以，不过有专门的图片处理软件昂，不但是photoshop还有其他软件的，专门用于分析这个的

如何用photoshop进行荧光双染的复合

2，高达HG的观星者的模型上色

个人认为，用荧光黄。上色的话用遮盖上色。其实用黑底加红条纹也是很不错的~

我推崇最简单的办法发光的黄色部分和绿色部分一律用荧光胶带裁切贴上晚上发光很好看的上色太麻烦了

高达HG的观星者的模型上色

3，急求间接免疫荧光双染实验步骤

FITC：操作步骤将纯化的IgG抗体对PH9～9.5碳酸盐缓冲液透析过夜，　　　　透析后抗体液移入小烧杯中　　　　　　　　　　　　　　↓　　　　称取适量IFTC，加入二甲亚砜(DMSO)(FITC～1mg/1ml DMSO)　　　　使终浓度为1mgFITC／1mlDMSO　　　　FITC／IgG比例:如IgG浓度为1mg／ml，FITC／IgG比例约为50μgFITC／mgIgG；　　　　如IgG为5～10mg／ml，则比例为25μgFITC／ml IgG　　　　在10ml小烧杯中先放入抗体　　　　　　　　　　　　　　↓　　　　按上述比例将FITC-DMSO溶液逐滴加入透析后的抗体溶液中　　　　　　　　　　　↓　　　　将标记物用PBS加至2.5ml，磁力搅拌器室温下避光搅拌2h　　　　　　　　　　　 ↓　　　　用PD10柱(Sephadex G25柱)除去游离荧光素，先用25ml PBS淋洗G25柱　　　　　　　　　　　 ↓　　　　收集PBS洗脱第一个荧光素结合蛋白峰，测定F／P　　　　比值。第二个荧光素峰为游离荧光素　　　　计算:　　　　　　　　　2.87×A495　　　　F／P＝————————　　　　　　　　A280-0.35×A495　　　　合适的F／P值为2～4。　注意事项：1.　FITC保存于4℃暗处，使用前待试剂瓶升至室温时开盖称取，以避免潮解。2.　FITC-DMSO液要临用时配制。3.　碳酸盐缓冲液要新鲜配制。

这个是重叠的。perk一抗用的是兔，二抗是568抗兔抗原；gfap一抗是小鼠，二抗是488抗小鼠。血清都用了donkey。照片当中perk跟gfap出来的一模一样，所以我怀疑俩片子出来的是不是都是gfap一种蛋白呢？实在太一样了。不能确定perk有没有染出来。我也做过perk & ox-6 和perk & neun的荧光双染，样像都跟这些照片一样，两种蛋白拍的照片一模一样，所以我怀疑是perk的问题。

急求间接免疫荧光双染实验步骤

4，PI 染色操作步骤

去百度文库，查看完整内容>内容来自用户:唐韵茹sharonPI 染色操作步骤1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中，离心，1500rpm , 5min，弃上清液。2、加入PBS 1ml离心洗涤1次，弃上清。3、加入2ml预冷的70%酒精，4℃固定30min，或是-20℃固定过夜。4、离心，弃上清液。5、用1×PBS 1ml洗涤1次，离心。6、加入RNase A (工作浓度20ug/ml)于500ul 1×PBS中，37℃孵育30min，离心。7、用1×PBS 1ml洗涤1次，离心。8、加入PI(工作浓度50ug/ml) 于500ul 1×PBS中，室温避光孵育30min。9、混匀，过300目筛网，置流式管中， 4℃冰箱保存，待测。GFP PI染色操作步骤1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中，离心，1500rpm , 5min，弃上清液。2、加入PBS 1ml离心洗涤1次，弃上清。3、加入2ml预冷PFA，PFA的浓度根据细胞的特点进行调节，4℃固定30min。以下步骤同PI 染色操作步骤的（4-9）细胞表面直接免疫荧光染色操作步骤1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中，离心，1500rpm，5min，弃上清液。2、以冷PBA 1ml，离心洗涤，弃上清液。3、加入用PBA稀释的荧光素标记的抗体200ul。用微量移液器轻轻吹打混匀，4℃或置冰上孵育30min-1h。4、离心弃上清液。5、加入冷PBS1ml,离心洗涤2次，以除去未结合的多余抗体成分。6、向细胞中加入冷PBS 500ul,吹打混匀，置流式管中，4℃避光保存，待测。5、 PBA适当稀释的荧光素标记的第二抗体200ul。吹打混匀，4℃或置冰上孵育30min，避光。

1. 收集细胞2. 3ml　pbs洗涤1次。3. 离心去pbs，加入冰预冷的70%的乙醇固定，4℃，1—2小时。4. 离心弃去固定液，3mlpbs重悬5min。5. 400目的筛网过滤1次，500—1000r/min离心5min，弃去pbs。6. 用1ml　pi染液染色，4℃避光30min。7. 流式细胞仪检测：pi用氩离子激发荧光，激光光波波长为488nm，发射光波波长大于630nm，产生红色荧光分析pi荧光强度的直方图也可分析前散射光对侧散射光的散点图。8. 结果判断：在前散射光对侧散射光的散点图或地形图上，凋亡细胞与正常细胞相比，前散射光降低，而侧散射光可高可低，与细胞的类型有关；在分析pi荧光的直方图时，先用门技术排除成双或聚集的细胞以及发微弱荧光的细胞碎片，在pi荧光的直方图上，凋亡细胞在g1/g0期前出现一亚二倍体峰。如以g1/g0期所在位置的荧光强度为1.0，则一个典型的凋亡细胞样本其亚二倍体峰的荧光强度为0.45，可用鸡和鲑鱼的红细胞的pi荧光强度做参照标准，两者分别为0.35和0.7，可以确保在两者之间的不是细胞碎片而是完整的细胞。注意事项：细胞凋亡时，其dna可染性降低被认为是凋亡细胞的标志之一，但这种dna可染性降低也可能是因为dna含量的降低，或者是因为dna结构的改变使其与染料结合的能力发生改变所致。在分析结果时应该注意。